Supports de migration en électrophorèse. QCM


électrophorèse

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Electrophorèse
كهرتهجير
Electrophoresis

En électrophorèse, les supports de migration électrophorétique sont variés, de la veine de Tiselius aux gels de polyacrylamide en passant par le papier, l'agarose et l'amidon. Chaque support présente des avantages et des inconvéniens.


ترتكز تقنية التهجيرالكهربائي (كهرتهجير، (Electrophorèse) على استغلال خاصية التأين (Ionicité) التي تعطي شحنة كهربائية معينة للجزيئات في وسط ذو رقم هيدروجيني (pH) معين. بإمكان الكهرتهجير أن تعطي معلومات عن وزن الجزيئات في حالة تساوي الشحنات الكهربائية للمواد الخاضعة للعزل. في حالة اعتماد خاصيتين في الكهرتهجير، يمكن التدخل لاعطاء الأولوية لخاصية معينة على حساب الأخرى. يتم ذلك بمعالجة مسبقة للمستخلصات، مثل ربط كل البروتينات بالمنظف SDS سالب الشحنة الكهربائية (-) الذي يكسبهم نفس الشحنة ليتم فرزهم من خلال حجمهم، فقط


QUESTION 1.En électrophorèse, les gels d'agarose sont souvent utilisés dans la séparation des composés suivants: (cocher la réponse juste) a) Isoenzymes
b) Protéines
c) Acides désoxyribonucléiques (ADN)
d) Lipoprotéines.


QUESTION 2. En électrophorèse, les gels d'amidon sont souvent utilisés dans la séparation des composés suivants: (cocher la réponse juste)
a) Isoenzymes
b) Protéines
c) Acides désoxyribonucléiques (ADN)
d) Lipoprotéines


QUESTION 3. En électrophorèse, les supports de migration qui donnent plus de résolution sont: (cocher la réponse juste)
a) Gels d'agarose
b) Gels de polyacrylamide
c) Gels d'amidon


QUESTION 4. La préparation des gels de polyacrylamide pour servir de supports d'électrophorèse, implique une réaction radicalaire où le persulfate joue un rôle capital par la réaction ci dessous. Quel rôle ont les radicaux libres sulfate (S.)?(cocher la réponse juste)

électrophorèse et supports de migration électrophorétique

a) transforment l'acrylamide et le bisacrylamide en radicaux libres en attaquant les doubles liaisons existantes entre deux atomes de carbone.
b) régulent le degré de réticulation des gels de polyacrylamide


QUESTION 5. Lors de la préparation d'un gel de polyacrylamide comme support d'électrophorèse, l'oxygène moléculaire et l'acidité élevée: (cocher la réponse juste)
a) accélèrent la réaction de polymérisation de l'acrylamide en activant la réaction radicalaire initiée par le persulfate
b) bloquent la réaction de polymérisation en étouffant la réaction radicalaire initée par le persulfate

QUESTION 6.L'augmentation de la température et l'alcalinité des solutions: (cocher la réponse juste)
a) freinent la polymérisation de l'acrylamide.
b) accélèrent la polymérisation de l'acrylamide
c) rendent les gels de polyacrylamides fléxibles


QUESTION 7. La riboflavine ou la riboflavine -phosphate (initiateur de la polymérisation de l'acrylamide): (cocher la réponse juste)
a) forme des radicaux libres une fois mise en présence d'un accélérateur de polymérisation comme TEMED.
b) nécessite la lumière UV ou fluorescente pour générer des radicaux libres en présence du TEMED comme accélérateur de polymérisation.


QUESTION 8. Une prélélectrophorèse: (cocher la réponse juste)
a) empêche l'effet de tassement (stacking) des molécules à séparer et élimine les ions ammonium (NH4+) et sulfate (SO4-) apportés par le persulfate d'ammonium.
b) est recommangée pour les gels discontinues


QUESTION 9. L'ADN purifié d'une plante et soumis à une digestion par une enzyme de restriction, a montré après électrophorèse sur 3 gels d'agarose de concentrations 0,8%, 1,0% et 1,5%, les profiles électrophorétiques A, B et C. Choisir l'ordre des concentrations des gels correspondant à la séquence A-B-C des profiles montrés par la figure.Le trait montré par la figure lie un fragment d'ADN de même poids moléculaire: (cocher la réponse juste): (cocher la réponse juste)

DNA electrophoresis

a) 1%-0,8%-1,5%.
b) 0,8%-1%-1,5%.
c) 1%-1,5%-0,8%.
d) 1,5%-1%-0,8%.


QUESTION 10. L'électrophorèse dans des conditions non dénaturantes (se déroulant avec des cuves refroidies) est souvent utilisée dans:(cocher la réponse juste)
a) séparation des protéines traitées avec SDS.
b) séparation des isoenzymes.
c) séparation de l'ADN.


QUESTION 11. Choisir l'information correcte: (cocher la réponse juste)

a) Les gels d'agarose sont propices pour la séparation des fragments d'ADN de taille faible.
b) Ce sont les gels d'agarose et les gels d'amidon qui sont les plus utilisés dans la séparation des isoenzymes.
c) Les gels de polyacrylamide sont propices pour la séparation des fragments d'ADN de taille faible.
d) Les gels de polyacrylamide ne sont pas convenables dans la séparation des isoenzymes.



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REPONSES BREVES

- Réponse à la question 1: choix c. L'AGAROSE EST SOUVENT UTILISEE POUR SEPARER L'ADN
- Réponse à la question 2: choix a. : LES ISOENZYMES SONT SOUVENT SEPAREES SUR GEL D'AMIDON
- Réponse à la question 3: choix b. LES GELS DE POLYACRYLAMIDE SONT PLUS RESOLUTIFS, MAIS L'ACRYLAMIDE EST TOXIQUES !
- Réponse à la question 4: choix a. LE RADICAL LIBRE SULFATE ATTAQUE L'ACRYLAMIDE (1 LIAISON DOUBLE ENTRE C) ET BIS ACRYLAMIDE (2 LIAISONS DOUBLES ENTRE C). IL EN RESULTE DES RADICAUX LIBRES ACRY ET BIS REAGISSANT ENTRE EUX POUR FORMER DES POLYMERES ET DES PONTS (RETICULATION).
- Réponse à la question 5: choix b. L'O2 ET L'ACIDITE FREINENT LA POLYMERISATION. SOUVENT ON DEGAZE LES SOLUTIONS AVANT ET ON UTILISE DU TEMED FORME BASIQUE.
- Réponse à la question 6: choix b. LA TEMPERATURE ET L'ALCALINITE ACCELERENT LA POLYMERISATION.
- Réponse à la question 7: choix b. LA RIBOFLAVINE NECESSITE LES RAYONS UV OU FLUORSCENTE POUR GENERER DES RADICAUX LIBRES UTILES POUR LA POLYMERISATION.
- Réponse à la question 8: choix a. LA PREELECTROPHORESE EST DECONSEILLEE POUR LES SYSTEMES DISCONTINUS (CONCENTRENT LES MOLECULES DANS LE STACKING GEL). ELLE EMPECHE LE TASSEMENT MAIS ELIMINE LS IONS AMMONIUM ET SULFATE (PROVENANT DU PERSULFATE) ET QUI PEUVENT GENER LA SEPARATION ELECTROPHORETIQUE.
- Réponse à la question 9: choix c. L'ADN MIGRE RAPIDEMENT SUR DES GELS MOINS CONCENTRES.
- Réponse à la question 10: choix b. ELECTROPHORESE NON DENATURANTE APPLIQUEE POUR LA SEPARATION DES ISOENZYMES, CAR LA REVELATION EXIGE UNE ACTIVITE BIOLOGIQUE.
- Réponse à la question 11: choix c.LES GELS D'AGAROSE, NE POUVANT DEPASSER LA CONCENTRATION 2% NE SONT PAS CONVENABLES POUR SEPARER LES ADN DE TAILLES FAIBLES


- Interprétation du zymogramme (isoenzymes) de la glutamate oxaloacétate transaminase (Ar):





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