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INVERTASE (أنزيم أنفرتاز). QCM DU TRAVAIL PRATIQUE


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Sciences de la vie. Protéines et Enzymes

INVERTASE (أنزيم أنفرتاز). QCM DU TP


A partir du saccharose, l'invertase (أنزيم أنفرتاز) libère du glucose (aldohexose, dextrose) et du fructose (cétohexose levulose). Le mélange est un sucre inverti lévogyre. L'activité de l'enzyme peut être évaluée par le dosage des sucres réducteurs par le DNS. --> Voir Vidéo du Travail Pratique



- إستخلاص أنزيم الأنفرتاز من خميرة المخبز
Extraction de l'invertase à partir de la levure boulangère et test de l'activité enzymatique (TP)

direction


QUESTION1 -invertase-. Choisir l'information correcte concernant la réaction enzymatique catalysée par l'invertase - cocher la réponse juste-Détail de la réponse

(!L'invertase est spécifique du saccharose.)(!La réaction enzymatique génère un mélange de sucres dextrogyre à partir du saccharose.)(La réaction libère du glucose -aldohexose, dextrose- et du fructose -cétohexose levulose-.)(!L'invertase libère un mélange de sucres dont la saveur sucrée est proche de celle du saccharose.)

QUESTION 2 -invertase.Choisir l'information correcte relative à l'action de l'invertase extraite de sources différente et dont les produits de la réaction enzymatique sont analysés par chromatographie sur couche mince -figure ci dessous-cocher la réponse juste-
Invertase. Sucre inverti (chromatographie)
(!L'invertase 1 -source: Saccharomyces cerevisiae- ne montre pas assez d'affinité pour le saccharose.)(!L’invertase 2 -source: Cryptococcus laurentii- ne pouvant intervertir tout le saccharose, présente moins d'interaction avec ce substrat.)(L’invertase 1 pouvant intervertir tout le saccharose, présente plus d'interaction avec ce substrat.)(!L'invertase 2 est plus purifiée que l'invertase 1.)

QUESTION 3 -invertase-. Choisir l'information correcte relative à l'invertase-cocher la réponse juste-Détail de la réponse (C'est une ß-fructofuranosidase)(!C'est une enzyme d'isomérisation)(!C'est une enzyme des parois cellulaires.)(!C'est une enzyme débranchante.)

QUESTION 4 -invertase-.Choisir l'information incorrecte relative à l'invertase: -cocher la réponse juste- Détail de la réponse

(!Enzyme générant des glucides dont la saveur sucrée dépasse celle du saccharose -sucre de table-.)(Enzyme à structure subunitaire et non glycosylée ou faiblement glycosylée.)(!Enzyme pouvant reconnaître des tri et tétrasaccharides.)(!Le sucralose -disaccharide artificiel- serait pour l'invertase un inhibiteur compétitif vis à vis du saccharose.)(!Le cuivre, se fixant sur les groupes sulfhydriles des systéines et méthionines de l'apoenzyme, serait pour l'invertase un inhibiteur non compétitif.)

QUESTION 5-invertase-. Préciser la nature du Triton X-100 et son rôle dans l'extraction de l'invertase de la levure boulangère -cocher la réponse juste- Détail de la réponse (!Détergent anionique qui détruit les structures lipidiques des membranes conduisant à l'extraction de l'invertase.)(!Composé à caractère hydrophobe réagissant avec les structures hydrophobes de l'invertase l'amenant à être facilement extraite.)(!Composé ayant une partie hydrophile et une partie hydrophobe dont lrôle est la protection de l'invertase.)(Détergent non ionique détruisant les structures lipidiques des membranes pour extraire l'invertase.)

QUESTION 6 -invertase-.Choisir l'information correcte relative à l'invertase -cocher la réponse juste- Détail de la réponse (!Le 2-mercaptoétahnol utilisé dans l'extraction de l'invertase a pour rôle de dissocier la paroi cellulaire.)(La réaction enzymatique catalysée par l'invertase est arrêtée par l'apport d'une solution basique -solution contenant aussi le DNS qui oxyde les sucres réducteurs-.)(!Le pH optimum de l'ivertase de la levure boulangère est de l'orde de pH 7,0.)(!La formation d'un sucre inverti composé de glucose de fructose ne peut être obtenu que par l'action d'une invertase.)

QUESTION 7 -invertase-. Choisir l'information correcte concernant le test de l'activité de l'invertase par dosage des sucres réducteurs utilisant le DNS -cocher la réponse juste- Détail de la réponse

(Le DNS sous sa forme habituelle -de couleur jaune-, est considéré comme oxydant pour les sucres réducteurs qui vont le réduire.)(!L'augmentation de l'absorbance à 540 nm -couleur rouge orange après traitement par DNS des produits de la réaction enzymatique catalysée par l'invertase- est un signe de d'oxydation du DNS.)(!Le DNS est faiblement réduit par le saccharose.)(!L'interconversion du fructose en glucose survenant à chaud et à pH basique, n'intervient pas dans le test d'activité enzymatique de l'invertase par le DNS.)

QUESTION à cases vides (invertase TP).

Afin de sélectionner une souche de levure boulangère préservant les fructanes du blé lors de la panification, on teste deux souches de levures pour leurs activités invertase sur le saccharose et le raffinose (Gal-Gluc-Fru). Un protocole d'extraction de l'invertase est adopté et les paramètres cinétiques Km et Vmax obtenus, ainsi que le rapport Vmax/Km (efficacité catalytique), sont résumés dans la figure suivante.
Remplir les cases vides par des mots ou nombres convenables (écriture en MAJUSCULES sans espace, sinon, copier et coller les mots proposés.
Pour la vérification des réponses, remplir toutes les cases, d'abord


levure invertase

1/ L'invertase est une enzyme qui libère toujours du: FRUCTOSE (GLUCOSE, FRUCTOSE, ALDOSE, CETOSE, GALACTOSE).
2/ Je prépare les deux enzymes invertase à partir des 2 souches de levure en suivant l'ordre logique: 1-3-5-7-8 (1-2-5-7-8, 1-3-5-7-8, 1-3-4-7-8, 1-3-6-7-8, 1-2-6-7-8) mL de tampon d'extraction.
3/ Le tampon d'extraction de concentration 100 mM, étant préparé à partir d'une solution mère 0,625 M. Pour en préparer 500 mL, il faut prélever:80 (8, 10, 20, 40, 70, 80, 100) mL de la solution mère et compléter à 500 mL par l'eau distillée.
4/ Le mélange réactionnel du test d'activité des deux invertases a un volume de 3 mL, dont 0,5 mL de substrat 0,24 M. La concentration finale du substrat dans le mélange est :40 (10, 20, 30, 40, 50, 55) mM
5/ Par rapport à l'invertase de la souche 1 de levure, l'invertase de la souche 2, a une affinité:INFERIEURE (IDENTIQUE, SUPERIEURE, INFERIEURE)vis à vis du raffinose.
6/ Par rapport à l'invertase de la souche 1 de levure, l'invertase de la souche 2, a une affinité: SUPERIEURE (IDENTIQUE, SUPERIEURE, INFERIEURE)vis à vis du saccharose
7/ Par rapport à l'invertase de la souche 1, l'invertase la souche 2 libérera des quantités de Fructose et de lactulose (Gal béta (1 --> 4)Fru) par substratINFERIEURES (SUPERIEURES, INFERIEURES, IDENTIQUES) à partir du raffinose
8/ Avec la levure boulangère de la souche 2, on pourrait:PROTEGER (DETRUIRE, PROTEGER, EDIFIER, RESTRUCTURER) les fructanes de la farine
9/ Si le prix de l'invertase est inversement proportionnel à son efficacité catalytique sur le raffinose, le prix de l'enzyme de la souche 2 sera2 (2, 3, 4, 6, 10) fois celui de l'invertase de la souche 1.
10/ Si le prix de l'invertase est inversement proportionnel à son efficacité catalytique sur le saccharose, le prix de l'enzyme de la souche 2 seraIDENTIQUE (SUPERIEUR, INFERIEUR, IDENTIQUE) à celui de l'invertase de la souche 1


DETAILS DES REPONSES


Réponse 1 (question 1). . L'INVERTASE LIBERE LE GLUCOSE (ALDOHEXOSE, DEXTROSE) ET LE FRUCTOSE (CETOHEXOSE, LEVULOSE). LE MELANGE EST UN SUCRE INVERTI A SAVEUR SUCREE SUPERIEURE A CELLE DU SACCHAROSE. L'invertase ou ß-fructofuranosidase, est une glycoside hydrolase qui hydrolyse le saccharose (سكر القصب, sucrose) en glucose et fructose par rupture des liaisons ß fructofuranosiques.
Réponse 2 (question 2). L'INVERTASE 1 DE Saccharomyces cerevisiae POUVANT INTERVERTIR TOUT LE SACCHAROSE, PRESENTE PLUS D'INTERACTION AVEC CE SUBSTRAT. Avec l’invertase 1 de Saccharomyces cerevisiae les produits de la réaction ne présentent aucune trace du saccharose
Réponse 3 (question 3). L'INVERTASE EST UNE BETA-FRUCTOFURANOSIDASE DONT LA LOCALISATION N'EST PAS LIMITE A LA PAROI CELLULAIRE. L'invertase est une ß-fructofuranosidase pouvant se trouver dans les parois cellulaires et d'autres organites dont les vacuoles.

invertase localization

Réponse 4 (question 4). L'INVERTASE EST A STRUCTURE SUBUNITAIRE FORTEMENT GLYCOSYLEEE. L'invertase est une enzyme à structure subunitaire et fortement glycosylée.
Réponse 5 (question 5). LE TRITON X-100 EST UN DETERGENT NON IONIQUE DETRUISANT LES STRUCTURE LIPIDIQUES DES MEMBRANES POUR EXTRAIRE L'INVERTASE. Le Triton X-100 est un détergent non ionique détruisant les structures lipidiques des membranes pour extraire l'invertase (comparaison des détergents).
Réponse 6 (question 6). C'est la solution basique du DNS QUI ARRETE L'ACTIVITE DE L'INVERTASE. La réaction enzymatique catalysée par l'invertase est arrêtée par l'apport d'une solution basique (solution contenant aussi le DNS qui oxyde les sucres réducteurs). Le sucre inverti est un mélange équimolaire de glucose et de fructose obtenu par hydrolyse du saccharose. L'hydrolyse est réalisée soit par l'invertase, soit par un acide.


Triton X-100


Réponse 7 (question 7). LE DNS SOUS SA FORME HABITUELLE OXYDE LES SUCRES REDUCTEURS. IL EST DONC REDUI EN UNE AUTRE FORME QUI ABSORBE LA LUMIERE A 540 nm. Le DNS sous sa forme habituelle (de couleur jaune), est considéré comme oxydant pour les sucres réducteurs qui vont le réduire.


Sucres réducteurs. Dosage DNS


Liens utiles:


- Invertase, Enzymologie. QCM contrôle noté
- Aller aux tests de l'effet de la concentration du substrat (notion de Km et Vmax) et effets des inhibiteurs
- Aller aux généralités sur l'invertase
- Faire un Contrôle temporisé et noté en enzymologie
QCM


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