Clonage des gènes (insertion dans un plasmide, transfert dans des bactéries et amplification par PCR). QCM

L'électrophorèse de l'ADN est réalisée sur gel d'agarose (0,5-3%) (كهرتهجير فوق هلام الأغاروز). L'ADN est visualisé par le bromure d'éthidium (BET).

QUESTION 1. Quel est le but du clonage d'un gène en biotechnologies agricoles ? (cocher la réponse juste)
(!Création de copies multiples d'un gène d'intérêt, ainsi les caractéristiques de ce gène peuvent être altérés.)(!Création de colonies cellulaires multiples contenant le DNA extrait.)(!Création de copies multiple du gène pour amplifier le DNA.To identify a gene of interest and make multiple copies of plasmids that contain the gene of interest.)(Identification du gène d'intérêt et création de copies multiples de plasmides contenant le gène.)

QUESTION 2. Consultez le document ci joint et répondez aux questions relatives à l'amplification d'un gène par PCR (cocher la réponse juste).
Impact des paramètres de la PCR sur l'amplification d'un gène de 1 kb cloné dans un plasmides de 5 kb. Dans cette simulation, on change les paramètres de la PCR par rapport aux paramètres témoins (montrés par la figure ci dessous). On lance l'essai (runs 1, 2, 3, 4) et on notes les changements affectant le rendement (yield), la pureté de l'ADN du gène et le temps exigé dans l'amplification complète
(!C'est l'augmentation de la température de l'élongation de l'ADN -extension- qui a donné une meilleure amplification du gène cloné dans le plasmide)(!C'est l'augmentation de la concentration des deux amorces -primers- qui a conduit à une meilleure amplification du gène cloné dans le plasmide)(!L'augmentation de la température de l'élongation de l'ADN -extension- a amélioré le rendement de l'amplification du gène par PCR)(C'est le changement de la température de fixation des amorces -annealing- qui a permis d'avoir une meilleure amplification du gène cloné dans le plasmide)(!La pureté de l'ADN du gène amplifié par PCR, est influencée par la concentration des amorces, suite à une inhibition de l'élongation )