Clonage des gènes et génie génétique. QCM Les biotechnologies modernes concernent l'introduction de gènes étrangers dans un organisme vivant (plante, animal, microorganisme). Elles englobent, entre aures, le clonage des gènes d'intérêt et le génie génétique.

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QUESTION 1. Choisir la proposition fausse: (cocher une réponse)
a) Les DNA circulaire et linéaire, contenant N sites restriction pour une enzyme de restriction, donnent respectivement, N et N+1 fragments, une fois coupés par cette enzyme.
b) Le clonage d'un DNA recombiné signifie l'isolement de colonies cellulaires contenant le construit du DNA recombiné specifique.
c) L'endonucléase EcoRI dont la coupure sur un DNA circulaire donne 4 fragments, est en faveur de la présence de 4 sites de restriction.
d) L'hybridation d'un DNA par une sonde exige une similitude de séquences entre les deux composantes.

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QUESTION 2.. La première étape dans le clonage d'un gène est: (cocher la réponse juste)
a) Traitement des plasmides par les enzymes de restriction.
b) Isolement du DNA à partir d'un organisme porteur du gène d'intérêt.
c) Insertion d'un plasmide dans une bactérie.
d) Culture des cellules sur agar

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Animation, QCM: clonage d'un gène (différentes étapes)

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QUESTION 3.Lors du clonage d'un gène, les plasmides sont intsérés dans les bactéries par: (cocher la réponse juste)
a) Transformation
b) Enzyme de restriction
c) DNA ligase

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QUESTION 4. Lors du clonage d'un gène, les fragments de DNA peuvent s'hybrider avec les plasmides qui ont été coupés avec la même enzyme: (cocher la réponse juste)
a) Vrai.
b) Faux.

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QUESTION 5. Lors du clonage, la DNA ligase joint les extrémités cohésives du fragment de DNA avec les extrémités cohésives du plasmide: (cocher la réponse juste)
a) Vrai
b) Faux

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QUESTION 6.Lors du clonage, si les cellules hôtes sensibles à l'ampicilline (aminopénicilline, antibiotique à spectre large), sont cultivées dans un milieu riche en ampicilline. (cocher la réponse juste)
a) Seules les cellules (bactéries) qui n'ont pas incorporé le vecteur résistant à l'ampicilline, peuvent se développer.
b) Toutes les cellules se développent .
c) Seules les cellules (bactéries) qui ont incorporé le vecteur résistant à l'ampicilline, peuvent se développer.

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QUESTION 7. Dans un mélange de DNA et de plasmide coupés avec la même enzyme de restriction, toutes les cellules forment des recombinants: (cocher la réponse juste)
a) Vrai.
b) Faux

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QUESTION 8. Parmi les propositions relatives à la PCR, laquelle est inexacte ? (cocher la réponse juste)
a) Elle nécessite la répétition de cycles alternant dénaturation, hybridation et synthèse.
b) C’est une technique d’amplification du DNA in vitro.
c) Elle nécessite l’utilisation d’amorces RNA.
d) Elle nécessite une polymérase thermostable.

QUESTION 9.La digestion d'un DNA par une enzyme de restriction a permis l'obtention de 3 fragments A, B et C de tailles différentes (voir figure). Séparés par électrophorèse sur gel d'agarose 1,5%, le profile attendu correspondra à: (cocher une seule réponse)

a) Profile 1.
b) Profile 2.
c) Profile 3.
d) Profile 4.
e) Profile 5.

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QUESTION 10. Quel est le but du clonage d'un gène en biotechnologies agricoles ? (cocher la réponse juste)
a) Création de copies multiples d'un gène d'intérêt, ainsi les caractéristiques de ce gène peuvent être altérés.
b) Création de colonies cellulaires multiples contenant le DNA extrait.
c) Création de copies multiple du gène pour amplifier le DNA.To identify a gene of interest and make multiple copies of plasmids that contain the gene of interest.
d) Identification du gène d'intérêt et création de copies multiples de plasmides contenant le gène.

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QUESTION 11. Consultez le document ci joint et répondez aux questions relatives à l'amplification d'un gène par PCR (cocher la réponse juste)
Impact des paramètres de la PCR sur l'amplification d'un gène de 1 kb cloné dans un plasmides de 5 kb.
Dans cette simulation, on change les paramètres de la PCR par rapport aux paramètres témoins (montrés par la figure ci dessous). On lance l'essai (runs 1, 2, 3, 4) et on notes les changements affectant le rendement (yield), la pureté de l'ADN du gène et le temps exigé dans l'amplification complète

a) C'est l'augmentation de la température de l'élongation de l'ADN (extension) qui a donné une meilleure amplification du gène cloné dans le plasmide
b) C'est l'augmentation de la concentration des deux amorces (primers) qui a conduit à une meilleure amplification du gène cloné dans le plasmide
c) L'augmentation de la température de l'élongation de l'ADN (extension) a amélioré le rendement de l'amplification du gène par PCR
d) C'est le changement de la température de fixation des amorces (annealing) qui a permis d'avoir une meilleure amplification du gène cloné dans le plasmide
e) La pureté de l'ADN du gène amplifié par PCR, est influencée par la concentration des amorces, suite à une inhibition de l'élongation

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Réponses. Détails

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Question 1: LES SEQUENCES DE L'ADN ET DE LA SONDE DOIVENT ETRE COMPLEMENTAIRES
Question 2:ISOLEMENT DE L'ADN = PREMIERE ETAPE DANS LE CLONAGE D'UN GENE
Question 3: PLASMIDES INSERES PAR TRANSFORMATION
Question 4: COUPURE AVEC LA MEME ENZYME EST NECESSAIRE POUR L'HYDRIDATION
Question 5: LA LIGASE SOUDE LES EXTREMITES DE L'ADN
Question 6: L'INCORPORATION DU VECTEUR RESISTANT FAIT ACQUERIR LA RESISTANCE AUX CELLULES
Question 7: QUELQUES CELLULES FORMENT DES RECOMBINANTS
Question 8: LA PCR N'UTILISE PAS D'AMORCE ARN
Question 9: LES FRAGMENTS DE FAIBLE TAILLE MIGRENT PLUS VERS L'ANODE (+)S
Question 10: CLONAGE: CREATION DE PLASMIDES RENFERMANT LE GENE D'INTERET
Question 11: L'augmentation de la température de l'élongation de l'ADN (extension) a diminué le rendement de l'amplification du gène par PCR.
Le calcul de la pureté de l'ADN du gène amplifié, prend en compte la concentration des amorces (nucléotides) et des dNTP");

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